Nueva técnica de biología molecular para el diagnóstico de tuberculosis en plasma
La técnica está dirigida a detectar el ADN bacteriano libre circulante utilizando un método ultrasensible de CRISPR. Se observó una sensibilidad del 96 % (80–100) y una especificidad del 94 % (71–100) en las muestras de adultos, y una sensibilidad del 83 % (36–100) y especificidad del 95 % (77–100) en la cohorte pediátrica, incluidos seis casos de tuberculosis extrapulmonar. La prueba se negativiza luego del tratamiento exitoso de la infección. The Lancet Microbe, 31 de mayo de 2022.
Resumen
Antecedentes: la tuberculosis sigue siendo una de las principales causas de mortalidad mundial, especialmente para adultos y niños que viven con el VIH (CLHIV), que son frecuentemente subdiagnosticados mediante análisis basados en la muestra de esputo. Se necesitan ensayos no basados en esputo para mejorar el diagnóstico de la tuberculosis y el seguimiento del tratamiento de la tuberculosis. Nuestro objetivo en este estudio fue determinar si la detección ultrasensible de ADN libre de células de Mycobacterium tuberculosis (Mtb-cfDNA) en la sangre puede diagnosticar la tuberculosis y evaluar las respuestas al tratamiento de la tuberculosis.
Métodos: en este estudio de diagnóstico molecular, analizamos el suero archivado de dos poblaciones de pacientes evaluadas para tuberculosis en Eswatini y Kenia para detectar Mtb-cfDNA, analizando el suero de todos los individuos que tenían volúmenes de suero suficientes y resultados de diagnóstico claros. Se utilizó un ensayo optimizado de tuberculosis mediada por CRISPR (CRISPR-TB) para detectar Mtb-cfDNA en suero en el enrolamiento de adultos y niños con presunta tuberculosis y sus contactos domésticos asintomáticos, y en el enrolamiento y durante el tratamiento de la tuberculosis de una cohorte de CLHIV sintomáticos en alto riesgo de tuberculosis, que proporcionaron suero longitudinal en el momento de la inscripción y durante el tratamiento de la tuberculosis.
Resultados: CRISPR-TB identificó casos de tuberculosis microbiológica y clínicamente confirmados en la cohorte de adultos predominantemente VIH-negativos de Eswatini con una sensibilidad del 96 % (27 [96 %] de 28, IC del 95 % 80–100) y una especificidad del 94 % (16 [94 %] de 17, 71–100), y con una sensibilidad del 83 % (5 [83 %] de 6, 36–100) y una especificidad del 95 % (21 [95 %] de 22, 77–100) en la cohorte pediátrica, incluidos los seis casos de tuberculosis extrapulmonar. En la cohorte CLHIV de Kenia, CRISPR-TB detectó todos (13 [100 %] de 13, 75–100) casos de tuberculosis confirmados y el 85 % (39 [85 %] de 46, 71–94) de los casos de tuberculosis no confirmados que se diagnosticaron por hallazgos clínicos no microbiológicos. Los CLHIV que dieron positivo para CRISPR-TB en el momento inicial del tratamiento tenían un riesgo de mortalidad 2,4 veces mayor a los 6 meses después de la inscripción. La señal de Mtb-cfDNA disminuyó después del inicio del tratamiento de la tuberculosis, con eliminación casi total o completa de Mtb-cfDNA 6 meses después del inicio del tratamiento de la tuberculosis.
Interpretación: la detección mediada por CRISPR de Mtb-cfDNA circulante parece prometedora para aumentar la identificación de la tuberculosis pediátrica y la tuberculosis asociada al VIH, y el potencial para el diagnóstico temprano y el control rápido de las respuestas al tratamiento de la tuberculosis.
Fondos: Departamento de Defensa de EE. UU., Instituto Nacional de Salud Infantil y Desarrollo Humano, Instituto Nacional de Alergias y Enfermedades Infecciosas, Centro de Investigación del SIDA de la Universidad de Washington y el fondo de dotación presidencial Weatherhead.
El artículo original:
Huang Z, LaCourse SM,Kay AW, et al. CRISPR detection of circulating cell-free Mycobacterium tuberculosis DNA in adults and children, including children with HIV: a molecular diagnostics study. The Lancet Microbe May 31, 2022. DOI:https://doi.org/10.1016/S2666-5247(22)00087-8.
Disponible en: https://bit.ly/3M9aZlF